Comment faire pour dépanner une HPLC Double-Pic

Chromatographie en phase liquide à haute performance ou HPLC, est une technique utilisée pour séparer les composés à partir d'une solution mixte. Un tube métallique rempli de billes de silice, appelée colonne de HPLC, est utilisé pour séparer la solution avant qu'elle ne soit détectée par le détecteur de CLHP. Un double pic du détecteur de lecture habituellement implique que quelque chose d'autre contamine le système. La plupart du temps, le problème réside dans la colonne de HPLC.

Instructions

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    Déterminer quel type de solvant qui est injecté dans le système HPLC. Si le solvant est plus forte que la phase mobile liquide qui passe à travers, le fractionnement de pointe peut se produire. Une solution simple est d'utiliser le même solvant dans la phase mobile en tant que solvant dans l'échantillon. Si le problème persiste, la colonne HPLC peut être contaminé.

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    Laver la colonne par pompage 100 pour cent du methanol ou de l'acétonitrile si le système HPLC pendant au moins 15 minutes. Cela permettra d'éliminer les matériaux fortement attachés liées à la colonne. Inverser la colonne et effectuer le même mode opératoire avec le même solvant. Ce processus permettra d'éliminer toute matière particulaire qui peut être encombrer la fritte-un filtre situé à l'avant de la colonne. Si la chromatographie continue à afficher des pics doubles, la colonne a été pollué par des contaminants solides.

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    Avec la colonne dans le sens inverse, la pompe 25 ml d'eau à 1 ml par minute. Rincer ensuite la colonne avec 25 ml d'isopropanol, le chlorure de méthylène et d'hexane successivement. Reconnecter la colonne dans la direction appropriée et rincer la colonne avec 25 ml de solvant de phase mobile. Si le double pic persiste, remplacer la colonne.

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