Comment faire un Elisa

Instructions

1. Préparer l'échantillon. Cette procédure varie largement selon le test ELISA spécifique. Par exemple, dans un test ELISA pour le VIH, le sérum sanguin est dilué 400 fois avant de l'appliquer à une plaque qui contient des antigènes du VIH.

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   Laver la plaque de supprimer tous les autres composants du sérum sanguin. Appliquer un anticorps secondaire qui se lie aux anticorps anti-VIH à la plaque et laver de nouveau la plaque. Cet anticorps secondaire est chimiquement lié à une enzyme qui contient maintenant la plaque en proportion de la quantité d'anticorps secondaire.

3. Appliquer un substrat pour rendre l'enzyme détectable. Cela provoque généralement l'enzyme à changer de couleur ou de fluorescence. Les résultats d'un test ELISA doivent être déclarés comme un certain nombre de sorte que le changement de couleur doit être quantifiée en quelque sorte.

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   Établir le seuil pour un résultat positif. Ceci est la partie la plus difficile de l'ELISA parce que le résultat peut couvrir un large éventail. Une valeur minimale doit donc être choisi pour identifier un résultat positif.

5. Effectuez un test ELISA sur un échantillon de contrôle avec une concentration connue de l'analyte et régler le signal que cet échantillon produit comme la norme. Tout échantillon d'essai qui donne un signal fort que l'échantillon témoin est un résultat positif.