Comment faire Potato Dextrose Agar

Préparation extrait de pomme de terre

1. Placez les pommes de terre dans une casserole avec environ 1,2 litres d'eau du robinet et faire bouillir sur un poêle pendant 1 heure.

2. Retirer la casserole du feu et laisser refroidir le liquide jusqu'à ce qu'il puisse être manipulé confortablement (environ 10 minutes).

3. Verser le liquide extrait de pomme de terre à travers un tamis ou une étamine et recueillir dans un autre récipient.

Préparation de la moyenne

1. Ajouter dextrose et de la gélose à 1 litre de l'eau de l'extrait de pomme de terre.

2. Tester le pH de la solution avec du papier de test de pH ou un pH-mètre.

3. 
   
   
   

   Si le pH est supérieur à 6,5, réglez-le en ajoutant une goutte de la solution d'acide chlorhydrique à un moment et un nouveau test.

4. Si le pH est inférieur à 6, l'ajuster en ajoutant une goutte de la solution d'hydroxyde de sodium à un moment et un nouveau test.

Stérilisation

1. Bien mélanger le milieu et de le diviser en lots plus petits de 250 mL versé dans les quatre flacons de 500 ml (Remarque: chaque flacon ne doit pas être plus qu'à moitié plein pour éviter ébullition).

2. Couvrir chaque flacon avec un morceau de papier d'aluminium sans serrer sertie, de sorte que la feuille ne tombera pas, mais ne faites pas un joint étanche.

3. Placez les flacons dans un autocuiseur.

4. Actionner l'autocuiseur en conformité avec les instructions du fabricant pour stériliser le PDA à 121 degrés C (250 degrés F) à une pression de 103 421 Pascals (15 psi) pendant 15 minutes.

5. 
   
   
   

   Couper l'autocuiseur et laisser revenir à la pression atmosphérique, puis retirer les flacons et les laisser refroidir jusqu'à ce qu'ils puissent être manipulés.

Verser la moyenne

1. Alignez les boîtes de Pétri stériles sur une surface plane.

2. Une fois les flacons ont refroidi à la température de manipulation, mais avant que le milieu commence à se solidifier, saisir un ballon avec une main et retirer et mettre de côté son couvercle en aluminium avec l'autre main.

3. Pour chaque boîte de Pétri, soulever le couvercle avec une main, remplir rapidement à mi-chemin avec un PDA liquide, et de remplacer le couvercle.

4. Répétez l'étape 3 ci-dessus jusqu'à ce que tous Pétri bombé sont remplis.

5. Si il ya un PDA reste, récupérer lâche le ballon avec son couvercle en aluminium d'origine, laisser refroidir et se solidifier, serrer le couvercle de papier d'aluminium et placer au réfrigérateur.